Можно ли делать электрофорез: Противопоказания к физиотерапии

Содержание

Физиотерапевтическое лечение в области гинекологии и акушерства

— При каких болезнях физиотерапия является единственным методом лечения?

Я не скажу, что физиотерапия является единственным методом лечения, она считается вспомогательным методом. Наиболее актуальна физиотерапия при спаечном процессе, при воспалении, хронических заболеваниях яичников, придатков, матки, при подготовке к беременности пациенток, имеющих в анамнезе выкидыши, неразвивающиеся беременности.

— Какие положительные эффекты наблюдаются при проведении физиолечения?

Наблюдается улучшение кровотоков в органах. Больше питательных веществ поступают в органы, они лучше снабжаются кислородом, лучше функционируют. Если есть острое воспаление, то после физиотерапии спайки не образуются, уменьшается спайкообразование.

— Какие противопоказания для этого метода?

Онкологические заболевания, кровотечения неясного генеза.

— Какое обследование необходимо перед назначением физиолечения?

Физиолечение подбирается индивидуально. Необходима консультация врача, назначается сдача анализов, например, мазок на флору. Проводится УЗИ, чтобы выбрать тип физиолечения.

— Что включает понятие физиолечение? Какие есть виды?

Физиолечение включает грязелечение, бальнеотерапию (когда используются минеральные воды), но чаще в клиниках используется аппаратная физиотерапия: магнитная терапия, фототерапия, лазерная терапия, электрофорез. Это распространенные методы физиотерапии.

— Есть ли ограничения в возрасте для применения физиотерапии?

Нет, в возрасте ограничений нет. В пожилом возрасте при сенильных атрофических изменениях используют физиотерапию для улучшения состояния, например, при недержаниях мочи.

— Существуют ли четкие показания для каждого метода физиолечения? Есть какие-то различия в назначении того или иного метода?

Чаще всего магнито-лазерная терапия используется при воспалительных заболеваниях. Электрофорез также используется при воспалениях, в послеродовом периоде для профилактики. То есть один метод лечения физиотерапии используется при разных ситуациях, при различных заболеваниях.

— А несколько методов одновременно имеют место быть?

Да, один дополняет другой. Чаще всего комбинируется магнито-лазерная терапия и электрофорез.

— Каков процесс проведения магнито-лазерной терапии и электрофореза при гинекологических заболеваниях?

Магнито-лазерная терапия выполняется двумя способами: полостным (когда во влагалище вводится датчик и действует на влагалище, на шейку матки, на вульву), и вне полостным (когда на поясничную область и живот ставится другой датчик). Существует внутривенно-лазерное облучение крови ВЛОК. Это тоже часто используемая физиотерапия, в том числе в гинекологии.

Электрофорез — это специальный аппарат, имеющий специальные пластины, которые накладываются непосредственно на область применения. Используются различные растворы, обладающие лечебными действиями. Под действием электрического тока растворы проникают в ткани. В гинекологии такие пластины накладываются на низ живота, на поясничную область. При климактерическом синдроме охватывается еще и воротниковая зона.

— Возможны осложнения после проведения магнито-лазерной терапии и электрофореза?

Только в электрофорезе при индивидуальной непереносимости раствора. А в целом, каких-то осложнений не бывает.

— Возможно заранее определить непереносимость с помощью анализов?

Да, это просто. Например, опрашиваем пациента. Если у него уже есть на что-то аллергия, из анамнеза это узнаем. Либо мы делаем контактную пробу: необходимо нанести вещество на кожу, ждать в течение 20 минут проявления негативного воздействия. Если негативной реакции не появилось, процедуру продолжают.

— Можно ли применять физиотерапию при беременности. Если можно, то какие виды?

Можно. Электрофорез магний используется при угрозе прерывания беременности после 8 недель беременности. Также электрофорез используется при токсикозе беременных в первом триместре с целью снятия симптоматики.

— Противопоказания — это сугубо индивидуальный аспект?

Противопоказания для физиолечения во время беременности определяются индивидуально. Если есть отслойка плаценты, началось кровотечение, то физиотерапия не используется. Она применяется при угрозе выкидыша, при болях. При тонусе матки назначают определенные лекарства. Только их не принимают внутрь, не выпивают таблетку, а эти препараты поступают в матку через кожу.

— Комбинировать медикаментозную терапию и физиолечение при беременности возможно?

Возможно, и одно дополняет другое. Комбинированное лечение дает хорошие результаты.

— Существует риск провести много сеансов физиотерапии или неправильно использовать методику?

Именно врач прописывает физиолечение, время воздействия на зону, интенсивность, частоту, периодичность. Некоторые процедуры назначаются ежедневно, некоторые через день или разово. У лечения есть временной промежуток и частота. Магнитотерапия, например, задается с определенной частотой. Если делать бесконтрольно, то это может навредить.

— Какое минимальное и максимальное число сеансов?

Назначается минимум от 10 сеансов. Максимально рассчитывается индивидуально. Врач определяет, насколько процесс благотворно влияет, нужно ли дальше продолжать. Если нужно, то меняется частота или интервал воздействия.

— Вредна ли лазеротерапия для будущего ребенка?

Нет, вредного воздействия лазеротерапии во время беременности не выявлено.

— Какие основные пункты положительного влияния физиотерапии на женщину?

Физиотерапия характеризуется противовоспалительным эффектом, который снимает отечность тканей, болевой синдром. Способствует улучшению кровотоков в органах, тем самым больше питательных веществ поступает в орган и больше кислорода.

Улучшается регенерация тканей, восстановление тканей. Улучшается кровоток в эндометрии, особенно у тех, у кого в анамнезе были аборты, выкидыши. Это подготавливает к беременности женщин в плане подготовки слизистой матки. Также используется для подготовки слизистой матки перед ЭКО. При послеоперационном лечении физиотерапия дает бактерицидный эффект.

Физиотерапия

Физиотерапия — область клинической медицины, изучающая физиологическое и лечебное действие естественных и преформированных физических факторов на организм человека. Она является одним из старейших лечебных и профилактических направлений медицины, которое включает в себя множество разделов.

Лечение с использованием природных факторов позволяет уменьшить количество применяемых пациентом лекарственных препаратов, а в некоторых случаях и вовсе от них отказаться. Фармацевтические препараты обладают множеством побочных эффектов и способны вызывать неблагоприятные симптомы и реакции. Физические факторы, как правило, воспринимаются организмом хорошо и позволяют достичь значительных успехов в лечении многих заболеваний.

Физиотерапия существенно расширяет диапазон лечебных методов воздействия и сокращает сроки лечения, не вызывает аллергию и лекарственную болезнь, усиливает действие лекарственных веществ, не формирует лекарственную зависимость, обычно не оказывает побочное воздействие на другие органы и ткани, даёт мягкий безболезненный лечебный эффект, использует неинвазивные методы лечебного воздействия, удлиняет период ремиссии хронических заболеваний.

Физиотерапия показана при воспалительных заболеваниях мужской и женской репродуктивной сферы и мочевыделительной системы, при кожных болезнях и косметических дефектах, в хирургии, стоматологии, гастроэнтерологии, травматологии и ортопедии, неврологии, ревматологии.

К сожалению в 1990-х и начале 2000-х годов физиотерапия была скомпрометирована навязчивой рекламой и широким распространением «чудодейственных» красных и синих лампочек, магнитиков, «лечебных» поясов и прочих псевдофизиотерапевтических аппаратов, не имевших никакого терапевтического эффекта, но значительно обогативших недобросовестных производителей и откровенных мошенников. В результате действенность физических методов лечения была подвергнута сомнению не только пациентами, но и некоторыми, в том числе имеющими административное влияние, специалистами. Это нашло своё отражение в стандартах лечения многих заболеваний, где физиотерапия отсутствует. На наш взгляд это необоснованное решение, игнорирующее достижения доказательной физиотерапии, опыт многих поколений специалистов, сотни диссертаций и монографий, посвящённых изучению лечебного воздействия на организм физических факторов.

В физиотерапевтическом кабинете нашей клиники используются только аппараты, имеющие регистрационные удостоверения Министерства здравоохранения РФ, клиническая эффективность методик работы на которых доказана:

·         Дарсонвализация

·         ДМВ-терапия

·         Магнитотерапия

·         Ультразвуковая терапия и фонофорез

·         Ультравысокочастотная терапия (УВЧ)

·         Фототерапия

·         Электрофорез лекарственных средств

Абсолютные противопоказания для физиотерапевтических процедур:

·         острое лихорадочное состояние;

·         менее 3 месяцев после острого инфаркмиокарда;

·         склонность к кровотечениям;

·         заболевания крови;

·         декомпенсация хронических заболеваний;

·         общее тяжелое состояние пациента;

·         кахексия;

·         психические заболевания, не позволяющие пациенту контролировать процедуру;

·         наличие кардиостимулятора;

·         Индивидуальная непереносимость определенного лечебного фактора.

Относительные противопоказания:

При наличии у пациента нижеприведенных состояний и заболеваний физиолечение проводить можно с выбором определенного метода воздействия, установкой индивидуального времени лечения и области проведения процедуры, а также методики манипуляции:

·         неопластические процессы;

·         нарушение целостности кожного покрова в месте проведения процедуры;

·         беременность и лактация;

·         желчнокаменная и мочекаменная болезнь;

·         выраженная гипотония;

·         тромбофлебит;

·         остеопороз.

ПАМЯТКА

принимающим физиотерапевтические процедуры

·         Приходите на процедуры в установленные дни и часы после лёгкого завтрака или через 2-3 часа после еды. Принимать процедуры натощак не рекомендуется.

·         Перед приёмом процедуры отдохните в течение 10-15 минут.

·         Сообщите медсестре о любом недомогании, слабости и повышенной температуре.

·         Отключите свой мобильный телефон в целях Вашей безопасности.

·         Во время лечения избегайте физического и умственного переутомления, достаточно отдыхайте, своевременно питайтесь, содержите в чистоте кожные покровы.

·         Внимательно выслушайте все указания медсестры, проводящей лечение, и строго выполняйте их во время и после процедуры.

·         Во время процедуры запрещается двигаться, касаться аппаратов, батарей отопительной системы, водопроводных труб, выключать аппарат и снимать электроды самостоятельно.

·         Во время приёма процедуры необходимо сидеть или лежать спокойно, соблюдать тишину и не читать. Спать во время процедуры не разрешается, кроме электросонтерапии.

·         Сообщайте медсестре о плохом самочувствии, болях, неприятных ощущениях во время процедуры.

·         Во время светолечения не разрешается самостоятельно изменять положение тела и расстояние до лампы. Не следует смотреть на источник светового излучения без защитных очков.

·         Перед приёмом УВЧ- и СВЧ-терапии удалите металлические предметы (шпильки, ключи, кольца, цепочки) из зоны воздействия во избежание ожогов, а так же часы во избежание их порчи.

·         Ингаляции принимают не ранее, чем через 1,5 часа после приёма пищи или физического напряжения. После ингаляции не следует разговаривать, петь, принимать пищу в течение часа.

·         Если назначено несколько физиотерапевтических процедур, ингаляции проводят после электротерапии и светолечения.

·         При появлении после процедуры на теле в местах воздействия неприятных ощущений или высыпаний обязательно сообщите об этом медсестре перед очередным сеансом.

·         После процедур избегайте переохлаждения, особенно в сырое и холодное время года. Не следует сразу выходить на улицу, отдохните в холле 20-30 минут.

·         В день проведения рентгенологических исследований физиотерапевтические процедуры принимать нельзя.


Совместимость физиотерапевтических процедур | санаторий «Березовий гай»

Рекомендации главного врача санатория

Курс лечения определяет лечащий врач, переносимость и совместимость процедур под контролем врача!

Лечебный комплекс назначается индивидуально с учетом формы и стадии болезни, особенностей клинической картины, наличия сопутствующих заболеваний, возраста больного, механизма действия физических факторов и их совместимости.

Комплексную терапию нельзя сводить к полипрагмазии (применение одновременно многих препаратов для процедур), потому что назначение большого количества процедур может стать чрезмерной нагрузкой для организма и обусловить усиление патологических нарушений, вызвать срыв адаптационных систем и даже привести к физиобальнеотравмам.

Многие физиобальнеопроцедуры вызывают значительную и длительную реакцию у больного, поэтому не следует назначать в один день несколько интенсивно действующих процедур. При суммации воздействия сильных раздражителей могут возникнуть различные функциональные нарушения со стороны нервной, сердечно-сосудистой и других систем организма.

В один день (при курсе 21 день) целесообразно ограничиться одной из следующих процедур: электрофорез, индуктотермия, УВЧ, КВЧ, ультразвук, парафино-озокеритовые аппликации, радоновые ванны. Можно сочетать УЗС с радоновыми ваннами с интервалом 4 часа, массаж с бальнеопроцедурами.

Процедуры на одну рефлексогенную зону, через которую осуществляется общее воздействие на организм (воротниковая, синокаротидна, поясничная зоны, слизистая оболочка носа), несовместимы в один день. В один день назначается одна общая процедура, здоровым — две с перерывом 4-6 часов (при курсе лечения 21-24 дня).

На одну локальную зону возможно назначение 1-2 лечебных процедур с оптимальным взаимодействием. Теплогрязелечение — парафино-озокеритовые аппликации при назначении их на рефлексогенные зоны или большие участки не совместимые с водными процедурами (ванны, души).

При планировании комплексной терапии особое значение имеет совместимость и несовместимость физиопроцедур, соблюдение последовательности и интервалов между процедурами: 20-30 мин. между местными процедурами, 1-2 часа между местной и общей процедурой, 4-6 часов между общими процедурами.

Радоновые ванны — комбинируются в один день с импульсными токами (диадинамотерапия, СМТ-терапия, интерференцтерапия, электростимуляция).

Радоновые ванны комбинируются в разные дни с гальванизацией, электрофорезом, УВЧ, КВЧ, индуктотермия, дарсонвализация, магнитотерапия, ультразвук, лазерным облучением, бальнеотерапией.

В правильно подобранном физиобальнотерапевтическом комплексе суммируются положительные эффекты нескольких физических факторов, которые действуют в одном направлении. Ослабляется отрицательное влияние отдельных компонентов, осуществляется воздействие на различные системы организма и стороны патологического процесса, увеличивается период последействия применяемых вместе процедур.

Главный врач А. С. Костриков

Электрофорез дома. Узнать больше о Электрофорез дома. Жмите.

Можно ли делать электрофорез дома?

Электрофорез представляет собой безболезненный способ лечения множества заболеваний, от легочных простудных явлений до болезней сердца и сосудов. В основе метода лежит воздействие электролитической диссоциации, при которой лекарственное средство делится на ионы и транспортируется в организм через кожу и эпителиальные ткани под воздействием тока. Процедура электрофореза достаточно сложна, поэтому ее обычно проводят в специальных медицинских кабинетах, однако в ряде случаев можно осуществить лечение в домашних условиях.

Классификация

По классификации физиотерапевтических методов лечения в современной медицине электрофорез относится к хроматографическим способам воздействия. Применение возможно в локальной области или в рамках общего лечения, в качестве стимулятора транспортировки веществ используется как постоянный, так и переменный ток импульсного вида. Отдельно рассматривается метод гальванофореза, который применяется посредством принудительного введения ионов в проводящую ток среду.

Показания и противопоказания к процедуре

Электрофорез дома и в клинике назначается как взрослым, так и детям. Способ помогает избавиться от следующих видов болезней:

  • мышечный гипертонус у ребенка: в данной ситуации применяют электрофорез с использованием эуфиллина для роста хрящей и стимуляции кровообращения.
  • бронхит:для лечения применяют электрофорез с кальцием: при мокрой разновидности используется хлорид вещества, а при сухой — йодид,воздействие позволяет снизить воспаление и прекратить сам процесс.
  • боль при хондрозах и артрозах:в данных случаях применяют мощные обезболивающие препараты, наиболее популярным является новокаин,курс лечения включает от 10 до 12 процедур, при сильной и продолжительной боли процесс проводится дважды в сутки.
  • фурункулез, меланома, угри:в этом случае электрофорез делают с медью.
  • келоиды: для их лечения применяют электрофорез на дому или в клинике с помощью лидазы и коллагена для уменьшения рубцов.
  • грыжа диска:электрофорез с применением карипазима позволяет размягчить новообразование и устранить боль от ущемления нервных корешков,курс лечения включает 20-30 процедур, для полного эффекта необходимо трижды повторить его.
  • болезни сердечно-сосудистой системы (гипертония, гипотония, патологические проблемы и т.д.)
  • болезни мочеполовой системы, гинекологические проблемы.
  • заболевания системы пищеварения.
  • болезни в области стоматологии и ортодонтии.

Это наиболее распространенные случаи, при которых электрофорез дома или в клинике поможет избавиться от болезни и ее симптомов. В качестве противопоказаний выделяют болезни почек, злокачественные онкологические явления, пониженную свертываемость крови, непереносимость электрического воздействия, открытые раны и гнойники, а также хроническую сердечную недостаточность.

Электрофорез в домашних условиях: о чем нужно помнить?

Проводить электрофорез на дому вполне возможно, однако для того, чтобы эффект был целительным, а не вредным, следует подробно изучить особенности применения для конкретного заболевания, инструкцию по креплению электродов на теле, научиться приготавливать растворы и ознакомиться с техникой безопасности. Перед применением важно точно узнать об отсутствии противопоказаний, для чего рекомендуется пройти комплексное обследование организма. Также нужно уточнить у врача рекомендуемое число сеансов и их продолжительность. Желательно пригласить медсестру для проведения первого сеанса, чтобы наглядно увидеть, как нужно осуществлять процедуру.

Электрофорез — это процедура, которая позволяет быстро и безболезненно лечить обширный спектр заболеваний. Провести такое лечение можно и в домашних условиях, поскольку современные аппараты могут быть приобретены и для частного использования, однако перед применением необходимо тщательно подготовиться, чтобы не нанести вред организму.

Физиотерапия – основные физиотерапевтические процедуры

Автор

Пилат Людмила Николаевна

Ведущий врач

Физиотерапевт

Физиотерапевтические процедуры широко используются в качестве вспомогательного средства при лечении заболеваний различных систем и органов. Они используются в послеоперационный период и в период реабилитации пациента после перенесенного заболевания или травмы. Благодаря физиотерапии эффективность лечения возрастает, процесс выздоровления протекает более быстро.

Физиотерапевты «Семейного доктора» располагают современными аппаратными средствами, позволяющими проводить необходимые и наиболее востребованные физиотерапевтические процедуры, среди которых:

  • TENS-терапия – транскутанная (то есть осуществляемая через кожу) электрическая нервная стимуляция – используется для восстановления сократительной способности пострадавших нервов и мышц, устранения болей неврологического или посттравматического происхождения.

  • Магнитотерапия – метод физиотерапии, основанный на действии магнитного поля. Стимулирует кровоснабжение тканей, способствует уменьшению отеков,  воспаления, болевых ощущений. Используется при лечении последствий травм, неврологических и кардиологических заболеваний, заболеваний опорно-двигательного аппарата. Позволяет повысить уровень физических нагрузок.

  • Миостимуляция – воздействие на мышцы слабым импульсным током, вызывающее их сокращение. Достигается укрепление мышц при отсутствии активных физических нагрузок. Восстанавливается тонус тканей, улучшается обмен веществ, снимается мышечное перенапряжение.

  • Импульсная коротковолновая терапия  — помогает в период постравматических состояний (при растяжениях, вывихах, ушибах, переломах, гематомах, ссадинах и т.п.), способствует заживлению ран, часто используется после операций на челюсти и конечностях и при некоторых типах воспалений. Данная терапия также показана пациентам с нарушениями периферического кровообращения.

  • СМТ-терапия (амплипульстерапия) –  разновидность электротерапии, при котором воздействие на организм осуществляется с помощью амплитудных пульсаций переменных среднечастотных токов (частотой от 2 до 5 кГц). Улучшает лимфо- и кровообращение в пораженной области, способствует снижению болевых ощущений.

  • Лазеротерапия — воздействие с помощью направленного светового потока (лазера). В результате в организме активизируются важнейшие биохимические процессы, обновляются ткани, восстанавливается их жизнедеятельность, включаются механизмы саморегуляции.

  • Ультразвуковая терапия.

  • Фонофорез – сочетание ультразвукового воздействия с действием лекарственных или косметических средств. Ультразвук повышает эффективность местного применения лекарственных препаратов.

  • Электрофорез  — введение лекарственных препаратов с помощью постоянного электрического тока.

  • УВЧ-терапия – физиотерапия с помощью ультравысокочастотного электромагнитного поля. Используется для лечения воспалений, травм, радикулита, невралгии.

  • УФ-терапия – воздействие на организм ультрафиолетовым излучением. Повышает сопротивляемость организма инфекциям, активизирует деятельность эндокринной системы и обмен веществ. Используется для восполнения дефицита витамина D, лечения дерматологических заболеваний.

Не занимайтесь самолечением. Обратитесь к нашим специалистам, которые правильно поставят диагноз и назначат лечение.

Оцените, насколько был полезен материал

Спасибо за оценку

 

Электрофорез при грыже

Электрофорез – метод электролечения, предполагающий совместное использование электрического тока и медикаментов. На область воздействия накладывается прокладка, смоченная лекарственным препаратом, после чего этот участок обрабатывается при помощи тока низкой частоты. В результате ткани организма воспринимают и пропускают медикаменты в несколько раз лучше, что значительно повышает эффективность их локального использования.

Широкое использование электрофореза при травмах, заболеваниях опорно-двигательного аппарата, мочеполовой системы, желудочного тракта и других проблемах, объясняется преимуществами этого метода:

  • препарат может вводиться локально в очаг заболевания, что позволяет точно рассчитать его концентрацию и доставить вещество именно к области, пораженной болезнью;
  • локальное введение препарата позволяет избежать появления побочных эффектов для всего организма;
  • благодаря электрофорезу в тканях образуется своеобразный запас лекарства, которое затем постепенно поступает к очагу заболевания;
  • описанная процедура позволяет доставить медикамент к требуемой области воздействия без повреждений кожи;
  • параллельно с введением препарата, электрический ток воздействует на обменные процессы в клетках и кровообращение, значительно активизируя их и увеличивая тем самым терапевтический эффект.

Положительные характеристики электрофореза и его действенность при заболеваниях опорно-двигательного аппарата делают его одним из часто используемых методов физиотерапии при грыже позвоночника. Электрофорез при грыже имеет свои особенности и должен проводиться под контролем специалистов.

Проведение электрофореза при грыже позвоночника

Межпозвоночная грыжа – патология, вызванная дистрофическими  изменениями в межпозвоночном диске и приводящая к разрыву фиброзного кольца с последующим выпадением внутренних тканей ядра диска.  В некоторых случаях грыжевое выпячивание лечиться оперативным способом. Однако современная медицина предлагает и другие методы терапии, позволяющие избежать операции, если они используются не на последней стадии. Одним их них является электрофорез при грыже. Этот метод был предложен свыше 10 лет назад профессором Найдиным В.П. и с тех пор неоднократно доказывал свою эффективность.

Основным препаратом, используемым при лечении грыжи электрофорезом, является карипазим (папаин). В его составе содержаться ферменты, получаемые из вытяжки папаи. Доставляясь непосредственно в область поражения, они локально создают следующие эффекты:

  • восстановление упругости повреждённых волокон межпозвоночного диска и их рубцевание благодаря усиленной выработке коллагена;
  • противовоспалительный эффект;
  • размягчение хрящевых тканей позвонков.

Результатом введения карипазима во время электрофореза при грыже является уменьшение её размеров, освобождение зажатого ею нерва и анельгизирующий эффект как следствие.

Процедура электрофореза является практически безболезненной и не вызывает сильных негативных ощущений у пациента. Курс терапии предполагает свыше 20 сеансов, что позволяет ощутить положительный эффект лечения. Процедура представляется собой наложение смоченных лекарством прокладок на больной отдел позвоночника и рядом с областью поражения – здесь всё зависит от расположения грыжи. На основную прокладку вливается карипазим, тогда как на две других – вещество эуффилин, призванное улучшить кровоснабжение в области грыжи и тем самым помочь доставить туда лекарство.

Электрофорез при грыже рекомендуется проводить в три курса с перерывами в два месяца. Перед началом процедур в обязательном порядке следует пройти консультацию у нашего физиотерапевта.  Имеются противопоказания

Физиотерапия

Методы диагностики и лечения

Консультация врача физиотерапевта первичная

500,00

Иглорефлексотерапия

700,00

Гальванизация (1 поле)

200,00

Электрофорез  лекарст.веществом  (препарат пациента) 1 зона

700,00

Электрофорез  лекарст.веществом  (наш препарат)

700,00

Электрофорез с  карипазимом

850,00

Электрофорез с  грязевыми салфетками 

700,00

Дарсонвализация (АмД «Искра-4»)  (1 зона)

300,00

Дарсонвализация (АмД «Искра-4»)  (2 зоны)

500,00

Диадинамотерапия (BTLVac)  (1 зона)

500,00

Диадинамотерапия (BTLVac)  (2 зоны)

800,00

Диадинамотерапия (BTLVac)  с грязевыми салфетками

700,00

СМТ-терапия  (1 зона)

300,00

СМТ-терапия  (2 зоны)

500,00

Интеференционные токи   (BTL -5000)  (1 зона)

500,00

Электростимуляция   (1 зона)

300,00

Электростимуляция   (2 зоны)

500,00

Магнитотерапия    (ВТL-5000)  (1 зона)

500,00

Магнитотерапия    (ВТL-5000)  (2 зоны)

850,00

Магнитотерапия    (ВТL-5000)  (3-4 зоны)

1000,00

Внутривенное введение    ОФР

500,00

Подкожное обкалывание ОКС (периартикулярно, паравертебрально)   

(1 зона)

500,00

Целлюлолиполиз бедра ОКС  (поинъекционно)

1000,00

Целлюлолиполиз боковых поверхностей тела ОКС (поинъекционно)

1000,00

Целлюлолиполиз передней брюшной стенки ОКС (поинъекционно)

1000,00

Инъекционная коррекция ягодиц   ОКС

1000,00

Общая инъекционная коррекция лица

от 500,00

Общая инъекционная коррекция лица и шеи

от 700,00

При каких заболеваниях используют физиотерапию?

Наиболее эффективна физиотерапия при лечении заболеваний:

  • позвоночника и суставов;
  • болевого синдрома;
  • спаечного процесса;
  • хронических гинекологических заболеваний;
  • реабилитации после операций и травм.

У нас физиотерапия применяется в различных областях медицины:

  • гинекологии;
  • урологии;
  • травматологии и ортопедии;
  • дерматологи;
  • педиатрии;
  • ЛОР-заболеваниях;
  • спортивной медицине;
  • внутренних болезнях.

Назначаются физиотерапевтические процедуры чаще всего после стихания воспаления, острого процесса или с целью купирования боли.

Кабинет физиотерапии оснащен самой современной аппаратурой, что позволяет проводить следующие методы лечения:

Каковы преимущества использования физиотерапии?

Преимущества применения физиотерапии:

  • безопасность;
  • доступность лечение;
  • комплексное воздействие на организм;
  • длительный терапевтический эффект;
  • благотворное влияние на нервную систему;
  • естественное укрепление иммунитета.

С помощью лечебных физических факторов активизируются механизмы, повышающие устойчивость организма к неблагоприятному воздействию внешней среды, а также к различным заболеваниям. В результате применения физиотерапевтических процедур исчезают или уменьшаются болевые приступы, нормализуется секреторная и моторная функции органов, снижается активность воспалительных процессов, усиливается регенерация тканей.

При использовании физических методов очень редко возникают аллергические реакции и не наблюдается лекарственной зависимости. Современная физиотерапия усиливает действие большинства лекарственных препаратов, что сокращает сроки лечения пациентов. Физиотерапевтические процедуры безболезненны, не оказывают побочного воздействия на органы и ткани. Использование физиотерапии увеличивает период ремиссии хронических заболеваний, снижает частоту рецидивов.

Как получить направление на физиотерапию?

Направить на лечение могут врачи из нашего центра или из других лечебных учреждений. Доктор осматривает пациента, уточняет необходимость применения физиолечения, возможность его сочетания с другими методами и направляет на консультацию к физиотерапевту. В направлении обязательно указывается диагноз и прилагаются данные обследования больного.

Что происходит на приеме у врача-физиотерапевта?

Перед сеансом физиотерапии доктор собирает анамнез, осматривает пациента, знакомится с результатами предварительного обследования. Это нужно для того, чтобы исключить все возможные противопоказания, выбрать метод лечения, необходимый конкретному пациенту, подобрать правильные дозировки лечебных препаратов.

Какое обследование необходимо перед назначением физиотерапии?

Обязательно нужен клинический анализ крови, общий анализ мочи, ЭКГ (для пациентов старше 40 лет), для женщин — осмотр гинеколога. Некоторым больным могут понадобиться рентгеновские снимки, данные УЗИ, МРТ, консультативные заключения других специалистов. В клинике физиотерапия проводится только компетентными специалистами, с участием опытного врача-физиотерапевта и специально обученных медицинских сестер.

Существуют ли противопоказания для назначения физиотерапии?

Противопоказания к физиотерапии следующие:

  • злокачественные новообразования в стадии, когда необходимо радикальное лечение (операция, химиотерапия, лучевая терапия) или имеются метастазы;
  • выраженная сердечная, дыхательная, печеночная, почечная недостаточность;
  • гипертоническая болезнь 3 стадии;
  • склонность к кровотечениям;
  • повышенная температура тела (выше 37,5 град.),
  • резкое общее истощение больного,
  • индивидуальная непереносимость физиопроцедур. 

Существуют ли возрастные ограничения для назначения физиотерапии?

Физиолечение может быть назначено с первых недель жизни ребенка, а в некоторых случаях с первых дней уже в роддоме. Существует мнение, что пожилым людям физиотерапевтические процедуры не показаны. Это не так. Если у людей пожилого и старческого возраста нет противопоказаний со стороны сердечно-сосудистой системы, физиолечение подбирается индивидуально под контролем ЭКГ и анализов крови.

Какие процедуры не сочетаются с физиотерапией?

От физиотерапии следует воздержаться в дни проведения сложных диагностических исследований (различные рентгеновские исследования, МРТ, пробы с физической нагрузкой. 

Addgene: Protocol — How to Run an Agarose Gel

  • Добавьте загрузочный буфер к каждому из ваших образцов ДНК.

  • Примечание: Загрузочный буфер служит двум целям: 1) он обеспечивает видимый краситель, который помогает с загрузкой геля и позволяет вам оценить, насколько далеко переместилась ДНК; 2) он содержит высокий процент глицерина, который увеличивает плотность вашего образца ДНК, заставляя его оседать на дно лунки геля вместо того, чтобы диффундировать в буфер.

  • После затвердевания поместите гель агарозы в контейнер для геля (блок для электрофореза).

  • Заполните коробку с гелем 1xTAE (или TBE), пока гель не покроется.

  • * Pro-Tip * Помните, если вы добавили EtBr в свой гель, добавьте также немного в буфер. EtBr заряжен положительно и будет двигаться в противоположном направлении от ДНК. Таким образом, если вы запустите гель без EtBr в буфере, вы достигнете точки, в которой ДНК будет находиться в нижней части геля, но весь EtBr будет в верхней части, и ваши полосы будут различно интенсивными.Если это произойдет, вы можете просто замочить гель в растворе EtBr и промыть водой, чтобы выровнять окрашивание после нанесения геля, как если бы вы изначально не добавляли EtBr в гель.

  • Осторожно загрузите лестницу молекулярной массы в первую полосу геля.

  • Примечание: При загрузке образца в лунку поддерживайте положительное давление на образец, чтобы предотвратить попадание пузырьков или буфера в наконечник.Поместите самый верхний конец наконечника пипетки в буфер прямо над лункой. Очень медленно и равномерно вытолкните образец наружу и наблюдайте, как образец заполняет лунку. После того, как весь образец будет выгружен, нажмите на пипетку до второго упора и осторожно поднимите пипетку прямо из буфера.

  • Осторожно загрузите образцы в дополнительные лунки геля.

  • Запустите гель при 80–150 В до тех пор, пока линия окраски не пройдет примерно 75–80% пути вниз по гелю.Типичное время работы составляет около 1-1,5 часа, в зависимости от концентрации геля и напряжения.

  • Примечание: Черный — отрицательный, красный — положительный. ДНК заряжена отрицательно и будет двигаться к положительному электроду. Всегда бегать к красному.

  • Выключите питание, отсоедините электроды от источника питания, а затем осторожно удалите гель из контейнера с гелем.

  • (необязательно) Если вы не добавляли EtBr в гель и буфер, поместите гель в контейнер, наполненный 100 мл рабочего буфера TAE и 5 мкл EtBr, поместите на качалку на 20-30 минут, замените Раствор EtBr водой и обесцвечивать 5 мин.

  • С помощью любого устройства, имеющего УФ-свет, визуализируйте свои фрагменты ДНК. Фрагменты ДНК обычно называют «полосами» из-за их появления на геле.

  • * Pro-Tip * Если вы собираетесь очищать ДНК для дальнейшего использования, используйте длинноволновое УФ-излучение и экспонируйте как можно меньше времени, чтобы минимизировать повреждение ДНК.

    Примечание: При использовании УФ-излучения защищайте кожу, надев защитные очки или маску для лица, перчатки и лабораторный халат.

    Используя лестницу ДНК на первой полосе в качестве ориентира (в инструкции производителя указан размер каждой полосы), вы можете сделать вывод о размере ДНК на дорожках для образцов. Для получения дополнительных сведений о проведении диагностических обзоров и о том, как их интерпретировать, см. Страница диагностического дайджеста.

    Если вы проводите определенные процедуры, такие как молекулярное клонирование, вам необходимо очистить ДНК от агарозного геля. Чтобы узнать, как это сделать, посетите Страница «Очистка геля».

    Электрофорез в агарозном геле — обзор

    Примечания к электрофорезу

    Мы используем электрофорез для разделения нуклеиновых кислот или белков по размеру и / или заряду, в зависимости от того, что мы добавили в наши решения (больше проблем с SDS-PAGE; см. главу 7). По сути, при гель-электрофорезе вы помещаете свои образцы в гелевую матрицу, и ваши отрицательно заряженные нуклеиновые кислоты (отрицательно заряженные из-за их фосфатной «основы») отталкиваются от отрицательного полюса ваших электродов к положительному полюсу на другом конце электрода. гель.Более крупные РНК и ДНК (и белки в SDS-PAGE) труднее проходят через гелевый матрикс, и поэтому вы можете разделить свои РНК / ДНК / белки по размеру. Кроме того, это единственный способ проверить результаты конечной ПЦР (см. Раздел ПЦР в главе 4). По моему опыту, использование гелей для электрофореза — это баланс между эффективностью и красотой: запуск геля при более высоком напряжении будет перемещать образцы по гелю быстрее, но получающиеся полосы с большей вероятностью будут размазаны (и если вы установите достаточно высокое напряжение, вы расплавите гель и разрушите всю свою тяжелую работу).Запустите гели при более низком напряжении, и вы получите более красивую картинку, но вам придется подождать.

    У меня есть опыт работы с тремя типами гель-электрофореза: электрофорез в агарозном геле, денатурирующий (формальдегидный) гель-электрофорез и электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE). Гели агарозы дешевы и могут использоваться для исследования стабильности РНК или ДНК. Денатурирующий гель-электрофорез можно использовать с РНК для нозерн-блоттинга, но в большинстве случаев он не нужен, если вашей целью является исследование стабильности РНК, которую можно исследовать с помощью электрофореза в агарозном геле.Хотя для электрофореза в агарозном геле можно приготовить растворы без РНКазы, я считаю, что это необходимо только для загрузочного буфера и воды, но не для геля или буфера. Растворы без РНКазы необходимы, если кто-то решает провести нозерн-блоттинг, которые не обсуждаются в этой книге. SDS-PAGE наиболее полезен для разделения белков и поэтому обсуждается в главе 7.

    При электрофорезе в агарозном геле используется один из двух буферов: трис-ацетат-EDTA (TAE) или трис-борат-EDTA (TBE). TBE имеет более высокую буферную емкость, чем TAE.Компоненты буфера ТВЕ выпадают в осадок из раствора при хранении в более высоких концентрациях (например, 10-кратный раствор), поэтому я держу 0,5-кратный запас и избегаю проблем с осаждением и стабильностью.

    Визуализация результатов электрофореза в агарозном геле обычно выполняется одним из двух способов: включение ДНК-связывающего флуорофора в раствор геля или сохранение этого флуорофора в буферном растворе, промывание в нем агарозного геля и использование этого раствора для многократного использования. гели. В обоих случаях вы будете использовать ультрафиолет, чтобы возбудить флуорофор и увидеть результаты эксперимента.Наиболее распространенным ДНК-связывающим флуорофором является бромид этидия (EtBr). EtBr токсичен, и ваш местный совет по охране окружающей среды и безопасности дает рекомендации, как с ним обращаться; делай то, что они тебе говорят. Другой распространенный флуорофор, который я использую, — SYBR Safe ™ 1 (Invitrogen). SYBR Safe ™ лучше справляется с тестами на токсичность на лабораторных животных, чем EtBr, но употребление чего-либо, связывающего ДНК, — не лучшая идея. По моему опыту, SYBR Safe ™ со временем разлагается в свободном растворе, но не в накопленном 10 000-кратном концентрате.Таким образом, я получаю стабильные результаты, добавляя SYBR Safe ™ (или EtBr) в раствор геля после того, как он достаточно остынет, перед заливкой геля. Когда флуорофор находится в свободном растворе, необходимо инкубировать гели в течение более длительных периодов времени, чтобы получить эквивалентное окрашивание в повторно используемом растворе; однако, если вы исследуете гели на флуоресценцию, вы не можете сказать, является ли отсутствие флуоресценции результатом того, что эксперимент не сработал, вы недостаточно долго инкубировали в растворе или вам нужно приготовить свежий раствор флуорофора. .Кроме того, промывание в растворе флуорофора обычно требует промывки в воде, чтобы уменьшить фоновый шум, и вы можете оставить его в воде на столько времени, чтобы вымыть флуорофор. В целом, я думаю, что включение флуорофора в гель — это правильный выбор, и вы со временем будете использовать его меньше, если не будете менять раствор для окрашивания каждые пару дней.

    Хорошим справочником по этому разделу является книга Кэти Баркер At the Bench . 2

    Модуль XVI

    Модуль XVI

    XVI. ЭЛЕКТРОФОРЕЗ: ПРИГОТОВЛЕНИЕ И ЗАПУСК АГАРОЗНЫХ ГЕЛЕЙ


    ВВЕДЕНИЕ

    В в этом модуле вы будете разделять молекулы ДНК по размеру, используя гель агарозы, который вы приготовили сами. Однако перед тем, как начать, прочтите справочный материал, следует.

    Гель электрофорез

    Электрофорез — это метод, который позволяет разделить молекулы в электрическом поле на основе размер / молекулярный вес и форма.А молекула будет мигрировать в электрическом поле, если у нее есть чистая положительная или отрицательная плата. Молекула с отрицательным заряд (анион) будет мигрировать и притягиваться к положительному электроду (аноду), и молекула с положительным зарядом (катион) будет мигрировать и притягиваться к отрицательный электрод (катод).

    Миграция и разделение молекул осуществляется с помощью сборного литья. гели, состоящие из твердой матрицы молекул, содержащей микроскопические поры.Молекулы разделены в зависимости от размера и формы за счет миграции через поры в геле. Разделение основано на различной подвижности геля. молекул разного размера и / или формы. Гелевая матрица задерживает движение молекул за счет эффекта захвата. Небольшие или компактные молекулы проходят через гелевую матрицу быстрее, чем большие или асимметричные молекулы, которые сталкиваются с большим сопротивлением трения в гелевая сетка.

    Гель-электрофорез — широко используемый метод в клеточной и молекулярной биология для разделения биологических макромолекул, таких как нуклеиновые кислоты (ДНК, РНК) и белки.Гелевая матрица для разделения белков обычно используется полиакриламид, водорастворимый сшитый полимер. Следовательно, разделение белки обычно проводят электрофорезом в полиакриламидном геле (PAGE). Обычно используется агароза, сложный линейный полисахарид. как матричный компонент для разделения ДНК и РНК. Поэтому эта гелевая система известна как электрофорез в агарозном геле. Разделение белка на полиакриламидных гелях и нуклеиновых кислот на агарозе гели образуют полосы, которые можно визуализировать с помощью различных методов обнаружения методы.

    Размер молекул нуклеиновой кислоты и белка обычно измеряется в разные единицы. Для ДНК и РНК длину удобно измерять в парах оснований (bps) или тысячах оснований (кбит / с). Для белков обычно измеряется молекулярная масса в Дальтонах (Да) или килодальтонах (кДа). Размеры молекул ДНК, РНК или белков, разделенных на гелях, могут быть оценивается путем сравнения со стандартными маркерами молекулярной массы известного размера которые проводились параллельно с неизвестными образцами во время гель-электрофореза.

    Относительная подвижность молекул, т.е. насколько быстро они проходят через Гель относительно друг друга зависит также от концентрации геля. Следовательно, гели с разной концентрацией, например, 1% и 2% агарозы или 12% и 15% полиакриламида используются для разделения молекул разного размера. Конкретный необходимый процент агарозы или полиакриламида зависит от размер молекул, требующих разделения. Как правило, чем меньше размер, тем выше процент агарозы или необходим полиакриламид.При заданном концентрации геля, расстояние, пройденное молекулой, будет обратно пропорционально пропорционально log10 молекулярная масса или количество пар оснований. Таким образом, чем больше или длиннее молекула, тем больше времени требуется для миграции через гель матрицы, как отмечалось ранее. Молекулы ДНК и РНК несут внутренний отрицательный заряд дается их фосфатным остовом. Белки, однако из-за разных зарядов каждого аминокислотного остатка будет имеют разные заряды на своей поверхности. Следовательно, для белков подвижность пропорциональна молекулярной массе. только если моющее средство, такое как додецилсульфат натрия (SDS), используется для покрытия поверхности белка и делают заряды равномерно отрицательными по всей своей длине.

    Агароза Гель-электрофорез

    Как отмечалось выше, ДНК — это полианион, несущий врожденный отрицательный заряд. дается его отрицательно заряженными фосфатами вдоль основной цепи ДНК. Таким образом, при электрофорезе в агарозном геле DNAS будет мигрировать через агарозу от отрицательного катода к положительному аноду.

    Части ДНК разного размера будут разделяться в зависимости от их размера. и форма. Низкая молекулярная масса (меньшая длина) ДНК будет двигаться через поры гелевой матрицы быстрее, чем более крупные. Однако форма молекулы ДНК также играет роль в ее движении, с самой быстро движущейся формой, известной как суперспиральная ДНК. Обладает высочайшей мобильностью благодаря компактности сверхспиральная форма. Линейный и кольцевые молекулы ДНК будут двигаться медленнее, потому что они, как правило, взаимодействуют с в большей степени с гелевой матрицей.Таким образом, линейные, кольцевые и суперспиральные формы ДНК, имеющие одинаковое количество оснований пары будут мигрировать с разной скоростью через гели агарозы.

    Разрешение молекул ДНК по их размеру / форме с использованием агарозного геля. электрофорез действительно замечательный. Хороший разделение может быть достигнуто с помощью молекул ДНК, размер которых отличается всего лишь на 1%, а также можно разделить две молекулы ДНК, которые отличаются только на одиночная сверхспиральная закрутка.Кроме того, этот метод можно использовать с ДНК. молекулы, содержащие от менее 10 пар оснований до 300 000 пар оснований.

    Гели с разной концентрацией агарозы должны использоваться для разного размера. диапазоны:

    0,8 — 1,5% агароза для ДНК размером до 50 000 п.н.

    0,2 — 0,4% агарозы для очень больших размеров ДНК

    Хотя электрофорез в полиакриламидном геле обычно проводят в вертикальный аппарат, электрофорез в агарозном геле проводят в горизонтальном конфигурация для обеспечения лучшей поддержки при низких концентрациях агарозы. Это приводит к меньшему искажению (разрушению) геля и полос ДНК. во время электрофореза. Подводная система, в которой гель полностью погруженный в буфер, самый простой в эксплуатации.

    Во время электрофореза вода подвергается электролизу, образуя протоны (H +). на аноде, а гидроксильные ионы (ОН-) на катоде. Катодный конец камера электрофореза становится основной, а конец анода становится кислая. Использование буферной системы поэтому необходимо.Два самых популярными буферами для агарозных гелей являются трис-борат-ЭДТА (ТВЭ) и трис-ацетат-ЭДТА (ТАЕ). Помимо их превосходная буферная способность, они также способствуют мобильности ДНК через гелевая матрица.

    В этом модуле вы будете использовать буфер TBE и 1% агарозный гель, работая смесь красителей-маркеров в качестве образца. Эти маркеры — это стандарты испытаний, обладающие свойствами, напоминающими нуклеиновые кислоты. Маркеры красителей ChromatrackTM вносятся пипеткой в ​​одну из лунок, сформированных в агарозный гель, затем подвергали электрофорезу. Уникальная смесь маркеров красителя содержит 6 маркеров красителя, которые будут мигрировать при разная молекулярная масса, что позволяет видеть различные цветные полосы на обычный комнатный свет.

    В следующей справочной таблице указаны приблизительные значения бит / с, с которыми отдельные отслеживающие красители мигрируют при различных концентрациях агарозного геля.

    ChromatrackTM График миграции (в бит / с)

    Краситель 0.75% 1,0% 4,0%

    синий 9 000 4 300 300

    желтый 2,600 1,800 100

    красный 1,300 900 50

    синий 950 600 25

    розовый 600 300 15

    оранжевый 200 100 <10



    УПРАЖНЕНИЕ # 1: ЭЛЕКТРОФОРЕЗ АГАРОЗНОГО ГЕЛЯ ВИДЕО

    Посмотреть видео презентация по электрофорезу в агарозном геле


    УПРАЖНЕНИЕ # 2: РАСПОЛОЖЕНИЕ МАТЕРИАЛОВ

    Найдите и убедитесь, что вы иметь все следующие материалы для проведения электрофореза в агарозном геле:

    Вкл. полка для реактивов:

    i) Chroma TrackTM краситель маркер

    ii) агарозный порошок

    В холодильник:

    i) 10-кратный буферный раствор TBE

    ii) мешалка / нагревательный блок

    iii) источник питания

    iv) баланс

    v) дозатор P20 и наконечники для дозаторов.

    vi) аппарат для электрофореза

    (емкость для геля и крышка)

    В выдвижной ящик для гель-электрофореза:

    i) лоток для гелевого литья с пеной колодки

    ii) лоток для геля (съемный из разливочного лотка)

    iii) гребень для формирования колодцев

    ВНИМАНИЕ: ВЫСОКОЕ НАПРЯЖЕНИЕ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ В ЭЛЕКТРОФОРЕЗЕ


    E XERCISE # 3: ЛИТЬЕ И ЗАПУСК АГАРОЗА ГЕЛЬ

    Порядок действий:

    1. Взвесьте агарозу, необходимую для получения 30 мл 1% геля. (Напоминание:% в данном случае — это вес на единицу объема, то есть граммы / 100 мл)

    2. Поместите взвешенную агарозу в стакан на 150 мл.

    3. Приготовьте 280 мл буфера 1X TBE из запаса 10X TBE. Бутылка с запасом находится в холодильнике. Храните буфер в пластиковой бутылке для хранения.

    4. Добавьте 30 мл 1X TBE к агарозе в химическом стакане.

    5. Добавьте стержень для перемешивания и поместите на мешалку / нагревательный элемент. Отключите перемешивание. 2 и нагрев до нет. 3.

    6. Осторожно перемешайте до легкого кипения, когда агароза растворится и жидкость Чисто.

    7. Осторожно снимите колбу бумажным полотенцем или перчаткой вокруг шеи. колбу и поставьте на скамью. Снимите мешалку с помощью съемника магнита.

    8. Дайте гелю немного остыть. (Все пластиковые части электрофореза агрегат термостойкий до 65oC, но жидкости следует охладить примерно до 50oC. перед заливкой, чтобы продлить срок службы агрегата). Используйте термометр.

    9. Убедитесь, что лоток для подачи геля надежно вставлен в отливку для геля. лоток, края лотка аккуратно прижаты к поролоновым подушечкам.

    10. Вылейте агарозу в лоток для геля.

    11. Добавьте расческу, чтобы сделать лунки, и дайте гелю застыть.

    12. Убедитесь, что выключатель питания блока электрофореза ВЫКЛЮЧЕН.

    13. Когда гель затвердеет, осторожно снимите гребешок, чтобы открыть лунки.

    14.Снимите лоток для подачи геля с лотка для литья и поместите его в бак для геля блока электрофореза

    15. Добавьте остаток 1X TBE, чтобы он полностью покрыл гель. Не используйте чрезмерный буфер, так как это приведет к короткому замыканию системы и снизить подвижность

    16. Используя дозатор P20, наберите 2 л ChromatrackTM. маркер красителя в средний колодец. Вставьте поместите кончик пипетки на дно лунки и медленно удалите жидкость.Будьте осторожны, чтобы не проткнуть агарозу и не проткнуть ее.

    17. Подключите токовые электроды (прикрепленные к крышке электрофореза) так, чтобы что маркеры красителя будут перемещаться к положительному аноду, т. е. соединять отрицательный электрод в положении лунок, а положительный электрод в другой конец геля.

    18. Включите источник питания и установите значение 100 В. Группа миграцию маркеров красителя можно наблюдать в процессе электрофореза.

    19. Гель следует использовать в течение 1 часа, пока все цветные полосы хорошо не разделятся. друг от друга. Чтобы увидеть полосы, ВЫКЛЮЧИТЕ источник питания, снимите крышку и поместите лист белой бумаги под резервуар с гелем, чтобы четко видеть цветные полосы.

    20. Обращаясь к диаграмме миграции, найдите соответствующие цветные полосы и их приблизительное количество пар оснований.

    21. Извлеките лоток для геля (с гелем в нем) из резервуара для геля.

    22.С помощью линейки измерьте расстояние, пройденное от колодца (в см) каждым цветная полоса.

    23. Используя полу-бревенчатую бумагу, постройте график зависимости количества пар оснований каждой цветной полосы от пройденное расстояние. сюжетная база пары в логарифмической шкале, а см мигрировали в линейной шкале. Проведите лучшую линию через эти точки, чтобы получить стандартная кривая.

    Протоколы электрофореза нуклеиновых кислот и введение

    Окрашивание и просмотр геля

    Гели, содержащие бромид этидия:

    • После электрофореза перенесите гель в УФ-трансиллюминатор и получите изображение геля.
    • Образцы будут отображаться в виде ярких полос.

    Гели, не содержащие бромистого этидия:

    • Осторожно промойте гель в дистиллированной воде, не содержащей РНКазы, в течение 10 мин, чтобы удалить формальдегид.
    • Перенесите гель после электрофореза в краситель SYBR ® Green Nucleic Acid Stain (1: 10 000) или раствор для окрашивания бромистым этидием 0,5 мкг / мл на 15–30 мин.
    • Если используется краситель с зеленой нуклеиновой кислотой SYBR ® , изображение геля может быть получено сразу после окрашивания.
    • При использовании бромистого этидия гель необходимо удалить в дистиллированной воде на 10-30 мин, убедившись, что гель полностью погрузился в воду.
    • Перенесите гель в УФ-трансиллюминатор и получите изображение геля.
    • Образцы будут отображаться в виде ярких полос.

    Электрофорез в полиакриламидном геле для определения ДНК

    Полиакриламидные гели образуются в результате реакции акриламида и бис-акриламида (N, N’-метиленбисакриламида), что приводит к образованию гелевой матрицы с высокой степенью сшивки.Акриламидные гели могут разделять фрагменты ДНК, различающиеся по длине даже на 0,2%. Хотя белки должны быть денатурированы с помощью SDS перед разделением на полиакриламиде, отрицательно заряженные молекулы ДНК денатурировать не нужно. По сравнению с агарозными гелями, полиакриламидные гели могут вместить большее количество образцов и обеспечить высокое разрешение фрагментов ДНК.

    Несмотря на то, что широко используются готовые гели для ПААГ для ДНК, их стоимость высока, если ПААГ является регулярной процедурой в лаборатории.Квалифицированный техник может приготовить гели PAGE с небольшими усилиями за небольшую часть стоимости готовых гелей. Гели PAGE, приготовленные собственными силами, обеспечивают лучшее разрешение и помогают в достижении стабильных результатов.

    Протокол: электрофорез в полиакриламидном геле для определения ДНК

    Необходимые материалы и реагенты

    Вертикальная камера для электрофореза с источником питания, стеклянными пластинами, распорками и гребнями

    • 30% раствор полиакриламида (фильтровать через фильтр 0,45 мМ и хранить в темноте при 4 ° C):

      29 г Акриламида
      1 г бис-акриламида
      100 мл бидистиллированной воды

    • 10% раствор персульфата аммония
    • ТЕМЕД
    • Буфер для электрофореза:

      1X TBE, приготовленный в дистиллированной воде:
      89 мМ Трис (pH 7.6)
      89 мМ борная кислота
      2 мМ ЭДТА

    • Буфер для загрузки геля 5X:

      80% глицерин 75%
      Бромфеноловый синий (B5525) 0,25%
      Ксилолцианол (X4126) 0,25%
      1M Трис (pH 7,4) 10 мМ
      5 М NaCl 10 мМ
      0,5 М ЭДТА 10 мМ
      10% SDS 0,1%

    • Бромид этидия 0,5 мкг / мл
    • Трансиллюминатор

      ВАЖНО : Акриламид и бис-акриламид нейротоксичны по своей природе.Все действия следует выполнять в перчатках без пудры.

    Процедура

    • Очистите стеклянные пластины и прокладки блока для литья геля деионизированной водой и этанолом.
    • Установите пластины с распорками на устойчивой поверхности.
    • Приготовьте раствор геля, используя следующие объемы (для 12 мл) в зависимости от требуемого процента геля.

    Электрофорез — MCAT Physical

    Если вы считаете, что контент, доступный через Веб-сайт (как определено в наших Условиях обслуживания), нарушает или другие ваши авторские права, сообщите нам, отправив письменное уведомление («Уведомление о нарушении»), содержащее в информацию, описанную ниже, назначенному ниже агенту.Если репетиторы университета предпримут действия в ответ на ан Уведомление о нарушении, оно предпримет добросовестную попытку связаться со стороной, которая предоставила такой контент средствами самого последнего адреса электронной почты, если таковой имеется, предоставленного такой стороной Varsity Tutors.

    Ваше Уведомление о нарушении прав может быть отправлено стороне, предоставившей доступ к контенту, или третьим лицам, таким как в качестве ChillingEffects.org.

    Обратите внимание, что вы будете нести ответственность за ущерб (включая расходы и гонорары адвокатам), если вы существенно искажать информацию о том, что продукт или действие нарушает ваши авторские права.Таким образом, если вы не уверены, что контент находится на Веб-сайте или по ссылке с него нарушает ваши авторские права, вам следует сначала обратиться к юристу.

    Чтобы отправить уведомление, выполните следующие действия:

    Вы должны включить следующее:

    Физическая или электронная подпись правообладателя или лица, уполномоченного действовать от их имени; Идентификация авторских прав, которые, как утверждается, были нарушены; Описание характера и точного местонахождения контента, который, по вашему мнению, нарушает ваши авторские права, в \ достаточно подробностей, чтобы позволить репетиторам университетских школ найти и точно идентифицировать этот контент; например нам требуется а ссылка на конкретный вопрос (а не только на название вопроса), который содержит содержание и описание к какой конкретной части вопроса — изображению, ссылке, тексту и т. д. — относится ваша жалоба; Ваше имя, адрес, номер телефона и адрес электронной почты; а также Ваше заявление: (а) вы добросовестно считаете, что использование контента, который, по вашему мнению, нарушает ваши авторские права не разрешены законом, владельцем авторских прав или его агентом; (б) что все информация, содержащаяся в вашем Уведомлении о нарушении, является точной, и (c) под страхом наказания за лжесвидетельство, что вы либо владелец авторских прав, либо лицо, уполномоченное действовать от их имени.

    Отправьте жалобу нашему уполномоченному агенту по адресу:

    Чарльз Кон Varsity Tutors LLC
    101 S. Hanley Rd, Suite 300
    St. Louis, MO 63105

    Или заполните форму ниже:

    Оценка кукурузного крахмала как заменителя агарозы в гель-электрофорезе ДНК | Примечания к исследованию BMC

    Методы

    Амплификация богатого гистидином белка-II (Hrp-II)
    Plasmodium falciparum

    Геномную ДНК амплифицировали с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР).Ампликон ДНК наносили на агарозный гель для определения молекулярной массы. После этого ампликон также обрабатывали гелем модифицированного кукурузного крахмала для сравнения.

    ПЦР выполняли с использованием мастер-микса для ПЦР New England Biolab (NEB). Общий объем реакционной смеси для ПЦР составлял 25 мкл. Пробирки переносили в термоциклер (GeneAmp ® PCR System 9700), установленный в соответствии с рекомендациями NEB. Вкратце, начальный процесс денатурации при 94 ºC в течение 30 с, процесс из 30 циклов, включающий три различных значения температуры и времени (94 ºC в течение 30 с, 55 ° C в течение 30 с и 68 ºC в течение 50 с), окончательный процесс продления при 68 ºC в течение 5 минут и выдержке при 4 ° C после завершения процесса.

    Приготовление 1 л буфера 1X TAE из 50X исходного материала

    Объем 20 мл 50X TAE (трис-ацетат EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота)) отмеряли в стакан емкостью 1 л. Долили 980 мл дистиллированной воды до отметки 1 л, чтобы получить рабочий раствор 1х.

    Приготовление 0,9% агарозного геля

    0,9 г порошка агарозы взвешивали и переносили в 100 мл приготовленного ТАЕ. Его осторожно перемешивали и нагревали в микроволновой печи в течение 60 с вначале, а затем 20 с до тех пор, пока раствор не стал прозрачным.Раствору давали остыть в течение 5 мин и 30 мкл окрашивающего красителя ДНК (безопасное окрашивание ДНК гелем Apex) пипеткой вносили в раствор агарозы. Раствор осторожно перемешивали и выливали в отливку из геля. Вставляли гребешок с пятнадцатью (15) лунками и давали гелю затвердеть. Гребень осторожно удалили, и гель поместили в горизонтальный резервуар для геля (Cleaver Scientific). Раствор 1 × TAE залили в резервуар с гелем до максимальной отметки.

    Загрузка образцов в агарозный гель

    Двадцать микролитров (20 мкл) 1 т.п.н. ДНК-лестницы (NEB) пипеткой вносили в первую (1-ю), девятую (9-ю) и двенадцатую (12-ю) лунки.Безопасный загрузочный краситель Apex (5X) был добавлен ко всем образцам для получения конечной концентрации 1X. Двенадцать микролитров (12 мкл) смеси ДНК и красителя загружали в четвертую (4-ю) и седьмую (7-ю) лунки и проводили электрофорез при 80 В и 300 Вт в течение 2 часов. Гель удаляли и наблюдали за образованием полос с использованием синего светового окна (Accuris Instruments ™ Smartdoc ™).

    Приготовление геля из кукурузного крахмала

    Промышленный кукурузный крахмал был модифицирован и использован для приготовления геля. Литературный поиск не нашел четкого протокола, подходящего для нашей цели.Поэтому мы изменили и скорректировали протоколы, описанные ранее [6]. Следовательно, мы использовали новый протокол для изготовления геля крахмала, изменив предыдущие. Взвешивали тридцать шесть граммов (36 г) кукурузного крахмала. Буфер с борной кислотой и гидроксидом натрия готовили путем отвешивания 1,855 г борной кислоты в стакан емкостью 1 л, который содержал 200 мл дистиллированной воды, и к раствору добавляли 0,48 г NaOH. В раствор доливают дистиллированную воду до отметки 1 л. Навеску кукурузного крахмала выливали в 200 мл приготовленной борной кислоты и буфера NaOH.Его очень хорошо перемешивали и оставляли на водяной бане в течение 30 минут при 50 ° C. Супернатант удаляли, а осадок оставляли. К осадку добавляли тридцать (30) мл дистиллированной воды и тщательно перемешивали. Осадок давали осесть и надосадочную жидкость осторожно сливали. Его сушили в течение ночи при 70 ° C в инкубаторе. После сушки крахмал растирали в однородный порошок с помощью пестика и ступки. Взвешивали 12 г модифицированного кукурузного крахмала. Сотню (100) мл буфера TAE отмеряли в стеклянный стакан и кипятили на горячей плите при постоянном перемешивании.Модифицированный крахмал добавляли к кипящему буферу ТАЕ и осторожно перемешивали до получения гомогенной смеси. Смеси давали остыть в течение примерно 3 минут, а затем пипеткой вносили тридцать (30) мкл гелевого красителя Apex ДНК и перемешивали для равномерного перемешивания. Охлажденный крахмал выливали в горизонтальный лоток для отливки геля со вставленным гребнем и оставляли на ночь при комнатной температуре для постепенного высыхания и достижения твердой текстуры.

    Загрузка образцов в гель кукурузного крахмала

    Двадцать микролитров (20 мкл) ДНК-лестницы размером 1 т.п.н. (NEB) пипеткой вносили в первую (1-ю), девятую (9-ю) и двенадцатую (12-ю) лунки.Мы добавили 5-кратный безопасный краситель для загрузки ДНК Apex во все образцы, чтобы получить конечную концентрацию 1Х. Двенадцать микролитров (12 мкл) смеси ДНК и красителя загружали в четвертую (4-ю) и седьмую (7-ю) лунки и проводили электрофорез при 80 В и 300 Вт в течение 2 часов. Гель крахмала удаляли и наблюдали за образованием полос с использованием синего светового окна (Accuris Instruments ™ Smartdoc ™).

    Результаты и обсуждение

    Крахмал состоит из двух больших α-связанных глюкозосодержащих полимеров, а именно меньшего и линейного (амилоза) и очень большого и сильно разветвленного (амилопектин) [7], тогда как агароза состоит из повторяющихся остатков 1,3-связанная β-D-галактопираноза и 1,4-связанная 3,6-ангидро-α-L-галактопираноза [8].Электрофорез в агарозном геле проводили в качестве положительного контроля для электрофореза в геле кукурузного крахмала. Геномная ДНК (ген Hrp-II), как и ожидалось, имела молекулярную массу 300 п.н. (рис. 1b). Гель крахмала готовили в течение 24 часов и давали вполне удовлетворительные результаты для электрофоретического использования. Эти наблюдения показали, что кукурузный крахмал в соответствующих и тщательно подготовленных условиях может быть использован для гель-электрофореза ДНК, особенно в странах с ограниченными ресурсами.Гель крахмала, приготовленный из модифицированного крахмала, сначала казался немного мутным и полупрозрачным с некоторой непрозрачностью при охлаждении по сравнению с гелем агарозы. Лунки, в которые были загружены образцы, были четко сформированы, что свидетельствует о гелеобразующих свойствах кукурузного крахмала (рис. 2). Образцы ДНК четко мигрировали через гель кукурузного крахмала в разное время на протяжении электрофореза, то есть через 10 мин (фиг. 3b), 30 мин (фиг. 3c) и 90 мин (фиг. 3d). Длина разветвленной цепи амилопектина и их распределение играют важную роль в влиянии на температуру желатинизации крахмала.Без других структурных различий, таких как содержание моноэфира фосфата, крахмал, который содержит более длинные разветвленные цепи, демонстрирует более высокую температуру желатинизации и образует более прочный гель [9]. Согласно Мейеру и его коллегам [10], крахмальная паста без добавления амилозы будет давать очень вязкую жидкость, и это наблюдалось в нашем эксперименте, отсюда необходимость модификации крахмала перед гелеобразованием. С другой стороны, использование более высокой концентрации крахмала без добавления амилозы может привести к образованию твердого геля [10].

    Рис. 1

    Сравнение гелей в синем свете. a Гель кукурузного крахмала в синем свете без видимых полос. b Гель агарозы в синем свете с полосами ДНК. Первая и последние 2 дорожки показывают лестницу ДНК размером 1 т.п.н., тогда как средние образцы показывают полосы ДНК с ожидаемой молекулярной массой около 300 пар оснований.

    Рис. 2

    Сравнение геля модифицированного кукурузного крахмала и геля агарозы. В обоих гелях четко сформировались лунки. a Гель кукурузного крахмала казался мутным и полупрозрачным. Он был хрупким. b Гель агарозы был прозрачным, твердым и простым в обращении.

    Рис. 3

    Миграция загруженной лестницы ДНК (DL) и образца ДНК (DS) на геле из кукурузного крахмала. a Показывает загруженные образцы (ДНК + безопасный ДНК-краситель Apex Safe) и лестницу ДНК размером 1 т.п.н. (DL) на крахмальном геле в начале. b Показывает миграцию образцов и DL через 10 мин после начала работы с гелем. c Показывает миграцию образцов и DL через 30 мин после начала работы с гелем. d Показывает миграцию образцов и DL через 90 минут после начала работы с гелем

    Во время нашего эксперимента миграция образцов ДНК и лестницы происходила через гель кукурузного крахмала, как показано на рис. 3, но полосы ДНК не наблюдались. при визуализации с использованием синего светового короба и ультрафиолетового светового короба. Отсутствие полос ДНК в кукурузном крахмале предполагает две вещи; либо перекрестные мостики между ДНК и окрашивающим красителем ДНК не образовывались из-за структуры крахмального геля, либо образовывались, но не были видны из-за уровня непрозрачности крахмального геля.Перекрестные мостики обычно образуются в результате перекрестной реакции между окрашивающим красителем ДНК (безопасное окрашивание ДНК гелем Apex) и молекулами ДНК, и они становятся видимыми в синем или ультрафиолетовом свете. Возможно, это было связано с различиями в реакционной способности крахмала и окрашивающего красителя ДНК. Во-вторых, полосы могли образоваться, но были невидимы из-за степени непрозрачности геля кукурузного крахмала. Аналогичный эксперимент был проведен Smithies [11], где он продемонстрировал групповые вариации сывороточных белков нормальных взрослых людей, используя крахмал в качестве геля для зонного электрофореза.Он обнаружил, что большинство новых компонентов, продемонстрированных методом крахмального геля, получены из α2-глобулина, который оказался сложной смесью многих различных белков, мигрирующих в крахмальных гелях впереди β-глобулина и некоторых позади. Точно так же Бернфельд и его коллеги [12] также провели эксперимент, в котором они показали разделение белка с помощью зонного электрофореза на крахмальном геле. Использование крахмального геля для разделения белков этими авторами дает надежду на будущие исследования того, что ДНК можно разделить с помощью крахмального геля.Поэтому мы рекомендуем продолжить работу по оптимизации геля крахмала при электрофорезе в геле ДНК.

    Электрофорез | Спросите у биолога

    Электрофорез в агарозном геле

    Электрофорез в агарозном геле позволяет разделять фрагменты ДНК по размеру. Обычно молекула ДНК переваривается рестрикционными ферментами, и электрофорез в агарозном геле используется в качестве диагностического инструмента для визуализации фрагментов. Электрический ток используется для перемещения молекул ДНК через агарозный гель, который представляет собой полисахаридную матрицу, которая функционирует как своего рода сито.Матрица помогает «поймать» молекулы по мере их перемещения электрическим током.

    Эта техника имеет множество применений. Вообще говоря, вы можете анализировать фрагменты ДНК, которые возникают в результате ферментативного переваривания более крупного фрагмента ДНК, чтобы визуализировать фрагменты и определить их размеры.

    Помимо полезности в исследовательских методах, электрофорез в агарозном геле является распространенным методом судебной медицины и используется для снятия отпечатков пальцев ДНК.

    А нельзя было просто покрасить?

    Бромид этидия представляет собой интеркалирующий краситель, что означает, что он внедряется между основаниями, расположенными в центре спирали ДНК.Одна молекула бромида этидия связывается с одним основанием. Когда каждая молекула красителя связывается с основаниями, спираль разматывается, чтобы принять напряжение от красителя.

    Замкнутая кольцевая ДНК ограничена и не может противостоять такому напряжению скручивания, как линейная ДНК, поэтому кольцевая ДНК не может связывать столько красителя, сколько линейная ДНК.

    Бромид этидия легко может попасть в ваши клетки. ДНК человека линейна и хорошо окрашивается. Это значит, что он может попасть в вашу ДНК и раскрутить ее. Это нехорошо, поэтому будьте осторожны и осторожны при использовании бромистого этидия.

    Есть также более безопасные и менее токсичные альтернативы, которые вы можете использовать. GelRed и GelGreen — это пятна ДНК, которые не могут проходить через клеточные мембраны, что делает их более безопасными в использовании и утилизации.

    Перемещение по матрице

    Молекулы фосфата, составляющие основу молекул ДНК, имеют высокий отрицательный заряд. Когда ДНК помещают в поле с электрическим током, эти отрицательно заряженные молекулы ДНК мигрируют к положительному концу поля, которое в данном случае представляет собой гель агарозы, погруженный в буферную ванну.

    Гель агарозы представляет собой сшитую матрицу, которая чем-то похожа на трехмерную сетку или экран. Молекулы ДНК притягиваются к положительному концу током, но они сталкиваются с сопротивлением этой агарозной сетки. Более мелкие молекулы могут перемещаться по сетке быстрее, чем более крупные, поэтому они продвигаются дальше по гелю, чем более крупные молекулы. Вот как электрофорез в агарозе разделяет разные молекулы ДНК в зависимости от их размера. Гель окрашивают бромидом этидия, чтобы вы могли визуализировать, как эти молекулы ДНК распадаются на полосы вдоль геля.

    Саузерн-блоттинг также можно использовать в качестве метода визуализации агарозных гелей.

    Неизвестные образцы ДНК обычно обрабатываются на одном геле с «лестницей». Лестница — это образец ДНК, размер полос которого известен. Итак, после того, как вы закончите свой образец, вы можете сравнить неизвестные фрагменты с фрагментами лестницы и определить приблизительный размер неизвестных полос ДНК по тому, как они соответствуют известным полосам лестницы.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *